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水產(chǎn)養(yǎng)殖中微生物制劑的應(yīng)用及研究進展

2016-05-05文章來源:湖北綠地
  隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展,養(yǎng)殖的高密度、集約化程度也不斷提高。然而養(yǎng)殖水質(zhì)卻污染惡化,養(yǎng)殖水體有毒有害物質(zhì)增加,使養(yǎng)殖生態(tài)系統(tǒng)嚴重失衡,導致細菌性、病毒性等病害的感染機率也隨之增大,進而養(yǎng)殖對象發(fā)病死亡率增加,最終影響水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。長期使用抗生素和其他化學藥物防治養(yǎng)殖病害常常引發(fā)一系列問題,而在高密度、集約化的養(yǎng)殖系統(tǒng)條件下,特別像近幾年南美白對蝦早期偷死,使用抗生素不僅反復性強,而且易產(chǎn)生很強的耐藥性,進而導致以后治療沒有效果,藥物防治疾病只是暫時性的手段,而且存在水產(chǎn)品食用安全性等問題;生態(tài)防治才是解決問題的根本出路,所以對水產(chǎn)養(yǎng)殖病害更重在“預(yù)防”。
    近幾年,水產(chǎn)微生物制劑成為研究熱點,其應(yīng)用也日趨普遍,如用于調(diào)水、肥水、改底、內(nèi)服保健等。水產(chǎn)微生物制劑通過調(diào)節(jié)養(yǎng)殖水體的微生態(tài)平衡,改善養(yǎng)殖環(huán)境,凈化水質(zhì),提高養(yǎng)殖對象免疫力與抗病能力,抑制病原微生物,進而減少養(yǎng)殖病害的發(fā)生。大量的實驗和生產(chǎn)實踐證明其具有良好的效果,并且不會出現(xiàn)耐藥性及殘留或污染等副作用。微生物制劑雖然在一定程度上可以成為抗生素的替代品,但由于其在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用時間較短,許多產(chǎn)品的使用技術(shù)尚不完善,微生物制劑的活性也會受到多種環(huán)境因素的影響。因此水產(chǎn)微生物制劑在研究、應(yīng)用以及質(zhì)量上目前還有許多亟待解決或改進的問題,本文根據(jù)最近幾年關(guān)于水產(chǎn)微生物制劑最前沿報道、相關(guān)實踐和有關(guān)資料對其常用種類及作用進行了闡述,對其應(yīng)用研究進展以及存在問題進行了總結(jié)分析,并對其發(fā)展前景進行了展望。
    1· 水產(chǎn)常用微生物制劑的種類及作用
    1.1 光合細菌
    光合細菌(Photosynthetic bacteria,PSB)是在厭氧條件下進行不放氧光合作用的細菌的總稱,屬于革蘭氏陰性菌。廣泛分布于自然界的土壤、水田、沼澤、湖泊、江海等處,目前在水產(chǎn)養(yǎng)殖上應(yīng)用較多的是紅假單胞菌屬,如沼澤紅假單胞菌。
    光合細菌具有多種生理功能,如能有效地將嫌氣細菌分解出的有毒物質(zhì)如氨態(tài)氮、亞硝酸等吸收利用,并吸收CO2及H2S 等,促進有機物的循環(huán),進而達到凈化水質(zhì)的目的。光合細菌在進行光合作用時不耗氧,也不放氧,而是通過吸收水體中的耗氧因子,如有機質(zhì)和H2S 等物質(zhì),從而使好氧微生物因缺乏營養(yǎng)而轉(zhuǎn)為弱勢,降低氧氣的消耗而直接起到增氧作用。另外可提高水體的透明度,促進浮游植物的光合作用,增大放氧量,也可間接起到增氧作用。
    光合細菌菌體本身含蛋白質(zhì)60%以上,并富含多種維生素、輔酶、抗病毒物質(zhì)及促生長因子等,可作為魚、蝦、蟹、貝等幼體培育時的生物餌料。黃鈞等在培育月鱷魚種試驗中得出在飼料中添加光合細菌,魚的增重可比對照組提高9.31%,飼養(yǎng)成本下降8.55%,與在對蝦、草魚、羅非魚等的試驗結(jié)果一致,表明光合細菌作為水產(chǎn)動物的飼料添加劑具有明顯的促長作用。另外施用光合細菌,形成優(yōu)勢菌群,維護水體微生態(tài)平衡,抑制病原微生物繁殖,預(yù)防水生動物發(fā)病,可克服消毒劑的缺點,有效降解水體的有害化學物質(zhì)。
    1.2 芽孢桿菌
    芽孢桿菌(Baciuus)為革蘭氏染色陽性菌,是一類好氧性細菌,抗逆性強,能產(chǎn)生多種消化酶、多種營養(yǎng)物質(zhì),促進消化、吸收。芽孢桿菌不僅可以降低水體中硝酸鹽、亞硝酸鹽的含量,還可以通過消滅病原體或減少病原體的影響進而改善水質(zhì)。芽孢桿菌通過產(chǎn)生抗體和進步嗜菌作用等刺激免疫,增強免疫活性,抑制或殺滅水體或養(yǎng)殖對象內(nèi)的有害致病菌,減少水產(chǎn)養(yǎng)殖對象病害的發(fā)生。實驗發(fā)現(xiàn)添加芽孢桿菌控制弧菌等致病菌比加抗生素更好。
    1.3 硝化細菌
    廣義上講,凡能使土壤或水域中的氨氮氧化成亞硝酸鹽和硝酸鹽的細菌都可稱為硝化細菌;嚴格意義上講硝化細菌是指利用氨或亞硝酸鹽作為主要生存能源,以及能利用CO2作為主要碳源的一類細菌。
    硝化細菌是一種好氧菌,是目前水產(chǎn)養(yǎng)殖中降解氨和亞硝酸鹽的主要細菌之一,在pH、溫度較高的情況下,分子氨和亞硝酸鹽對養(yǎng)殖對象的毒性較強,而硝酸鹽不僅對養(yǎng)殖對象無毒害,而且還可被藻類利用,促進藻類的生長和水質(zhì)凈化。
    1.4 乳酸菌
    乳酸菌(lactic acid bacteria)是一種厭氧或兼性厭氧菌,能在pH 3.0~4.5 條件下生長的無芽孢、革蘭氏染色陽性細菌的總稱。其通過降解碳水化合物生成乳酸和其他有機酸,使養(yǎng)殖對象腸道內(nèi)的pH 值下降,從而抑制大腸桿菌、沙門氏菌等的生長和繁殖。另外乳酸菌合成的B 族維生素和短鏈脂肪酸能中和養(yǎng)殖對象體內(nèi)的有毒物質(zhì)的毒性,如抑制胺的合成等。
    1.5 酵母菌
    酵母菌(yeast)是一些單細胞真菌,營養(yǎng)成分含量很高。維生素含量比魚粉高30 倍以上,尤其是富含B 族維生素。氨基酸含量也很高,且比例適當,廣泛用于飼料添加劑;近幾年來被廣泛用作水產(chǎn)養(yǎng)殖水質(zhì)調(diào)節(jié)劑,并取得了較好效果。酵母菌是喜生長于偏酸性環(huán)境中的好氧菌,可以在消化道內(nèi)大量繁殖,使其在與有害菌生存競爭中成為優(yōu)勢種群,有效抑制有害病原菌的生長。
    1.6 蛭弧菌
    蛭弧菌(Bdellovibrio bacteriovorus)是寄生在某些細菌并導致其裂解的一類細菌,最早是由德國的stolp 在土壤中發(fā)現(xiàn),并從污水中分離出此細菌。蛭弧菌能防止或減少魚、蝦、蟹病害的發(fā)展和蔓延,改善魚、蝦、蟹體內(nèi)外環(huán)境,促進生長,增強免疫力。
    1.7 復合微生物制劑(如EM 菌)
    EM 菌(Effective Microorganisms)是由光合細菌、乳酸菌、酵母菌等5 科10屬80 余種有益微生物采用適當?shù)谋壤酮毺氐陌l(fā)酵工藝復合培養(yǎng)而成的一種新型微生物活菌劑。EM 菌目前已廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè),EM 菌中的有益微生物經(jīng)固氮、光合等一系列分解、合成作用,使水中的有機質(zhì)形成自身或餌料生物生長繁殖用的各種營養(yǎng)元素,同時也能增加水中的溶解氧,降低氨、H2S 等有毒物質(zhì)的含量,進而起到凈化水質(zhì)的目的。
    2 ·水產(chǎn)養(yǎng)殖中微生物制劑的應(yīng)用研究進展
    最早應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的微生物制劑是“光合細菌”,主要用于改善水質(zhì);其后,水產(chǎn)微生物制劑的研究和開發(fā)領(lǐng)域也更加廣泛,目前己有乳桿菌屬、雙歧桿菌屬、弧菌屬、假單胞菌屬、芽孢桿菌屬的眾多種類等應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)。
    2.1 魚
    Kozasa 最早用從土壤中分離的芽孢桿菌經(jīng)培養(yǎng)后處理愛德華氏菌感染的日本鰻鱺,降低了其死亡率;張慶等每隔25 d 向羅非魚養(yǎng)殖水體中添加以芽孢桿菌為主的微生物復合菌劑,發(fā)現(xiàn)能明顯改善水質(zhì)條件,有效降低氨氮與亞硝酸鹽,營造良好的水色,促進羅非魚的生長。Gatesoupe 等將乳酸桿菌用于大菱鲆養(yǎng)殖,發(fā)現(xiàn)可以抑制致病弧菌引起的疾病。桂遠明等從正常的鯉魚腸道中分離出JY10(節(jié)桿菌)和JY13(乳桿菌),將它們制成微生物制劑并添加到飼料中,以該飼料飼喂鯉魚,增加了抗病能力。呂耀平在異育銀鯽養(yǎng)殖水體中添加復合微生物制劑,能顯著降低NH3-N、NO2-、COD等水產(chǎn)養(yǎng)殖有害因子的含量,增加溶解氧,緩沖pH 值,并有利于有益單胞藻(硅藻、綠藻等)成為優(yōu)勢種群促進異育銀鯽生長,提高其產(chǎn)量。俞吉安等研究應(yīng)用光合細菌添加劑,添加量為2%時,投喂草魚、鳙魚和鰱魚夏花苗成活率可提高5%~28%,畝產(chǎn)量可提高15%~30%,餌料系數(shù)下降20%~23%。金滿洋等在池塘養(yǎng)殖中施用EM 活性微生物水產(chǎn)專用肥,結(jié)果單位面積凈產(chǎn)量魚種池提高17.8%,成魚池提高14.4%。何敏等研究復合微生物制劑對重口裂腹魚生長、腸道消化酶和菌群以及水質(zhì)指標的影響,結(jié)果表明復合微生物制劑能改善水質(zhì),提高重口裂腹魚腸道消化酶活性、增加腸道有益菌群數(shù),促進魚體生長。
    2.2 蝦
    李躍華等在青蝦養(yǎng)殖池施用兩種不同的微生物制劑,結(jié)果池水的溶解氧、總磷增加,氨氮值下降,試驗池青蝦的生長速度明顯要大于對照池;薛恒平等將用芽孢桿菌、光合細菌、蛭弧菌等制成的“益生菌王”,用于對蝦池凈化,結(jié)果證明:實驗組對蝦病毒病的爆發(fā)時間延遲10d,產(chǎn)量增加40%。符澤雄用微生物制劑飼養(yǎng)南美白對蝦,發(fā)現(xiàn)對蝦生長快,節(jié)省飼料,能有效防治蝦病,無藥物污染;與對照池相比較,生長速度快21.9%,產(chǎn)量提高33.1%,飼料系數(shù)降低0.16。李勤生等指出,在斑節(jié)對蝦育苗中應(yīng)用光合細菌可促進變態(tài),縮短變態(tài)時間;張超峰等在南美白對蝦養(yǎng)殖中應(yīng)用指出光合細菌含有抗病毒因子和多種免疫促進因子,能提高南美白對蝦的抗病力和免疫功能;韓士群在對蝦池中投加硝化細菌后,水體中氨氮濃度僅為對照池的40%。黃永春等以EM 作為飼料添加劑和水質(zhì)凈化劑應(yīng)用于斑節(jié)對蝦的養(yǎng)殖,結(jié)果表明,EM 能改良水質(zhì)條件,促進對蝦生長。Garriques 等將溶藻膠弧菌用于蝦苗培養(yǎng),幼苗的生長率得到提高,疾病的發(fā)生率和嚴重性均有所減少或降低。葉樂等在凡納濱對蝦育苗中添加益生菌,結(jié)果益生菌能顯著降低水體中的H2S、NH4+-N 和NO2--N 含量,提高幼蝦成活率。Rengpipat 等發(fā)現(xiàn)益生菌可提高黑虎蝦的免疫能力。仇麗用枯草芽孢桿菌養(yǎng)殖凡納濱對蝦,與常規(guī)蝦池對照,氨氮、亞硝酸含量都有明顯下降,還達到了增產(chǎn)的效果。
    2.3 蟹及其它
    李士虎等在河蟹育苗池添加微生物制劑,與對照池比較結(jié)果發(fā)現(xiàn),試驗組的水質(zhì)狀況均好于對照組,幼體變態(tài)率平均提高了20%,抗生素等藥品使用量平均減少85%, 病害發(fā)生率平均降低31%,對照組的換水率為485%,而微生物制劑處理組均為150%,平均減少換水量56%,生產(chǎn)成本平均降低21%。陳家長將蛭弧菌用于河蟹養(yǎng)殖時發(fā)現(xiàn),施用后水體中的COD、氨氮、H2S 等含量明顯降低。
    王德芝等將光合細菌菌液按不同劑量加入到中華鱉養(yǎng)殖試驗池中,發(fā)現(xiàn)在較短時間內(nèi)就會使氨氮等出現(xiàn)不同程度的下降,水中溶解氧均有上升。Gibson 等在牡蠣幼苗的感染實驗中證實有益微生物可以產(chǎn)生抑制有害微生物的外源物質(zhì)。Douillet 等將菌CA2(可能是氣單胞菌屬的某些種) 應(yīng)用于太平洋牡蠣幼苗繁殖中,與單獨使用藻類相比較,喂食藻類和菌CA2 的太平洋牡蠣幼苗的存活率提高21%~22%,生長率提高了16%~21%。
    劉麗等在皺紋盤鮑育苗生產(chǎn)中施用光合細菌紅假單胞菌和枯草芽孢桿菌的混合菌液,結(jié)果發(fā)現(xiàn),該混合菌液能促進皺紋盤鮑苗的生長,提高其免疫情況。林阿乞等將蛭弧菌應(yīng)用于九孔鮑養(yǎng)殖,發(fā)現(xiàn)施用蛭弧菌能明顯提高九孔鮑的生長和存活率,并能有效控制和消除養(yǎng)殖水體中的弧菌數(shù)。黃亮等研究發(fā)現(xiàn)蛭弧菌可以有效地清除牡蠣養(yǎng)殖環(huán)境和體內(nèi)的副溶血弧菌。楊鳶劼等把芽孢桿菌、光合細菌應(yīng)用到河鲀養(yǎng)殖中,結(jié)果表明能促進優(yōu)良單細胞藻類的生長,營造良好水色,氨氮、亞硝酸鹽、H2S 的含量降低,水體環(huán)境得到了改善,而且光合細菌也是河鲀初孵仔魚優(yōu)良的開口餌料。
    3 ·微生物制劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中存在的問題
    微生物制劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用雖然日益廣泛,但仍還處于發(fā)展的初級階段,在管理體制和基礎(chǔ)理論研究等方面有許多問題有待于進一步研究。例如,水產(chǎn)微生物制劑產(chǎn)品都標注為非藥品,管理機構(gòu)和管理辦法不明確,基礎(chǔ)理論研究也比較薄弱,致使水產(chǎn)業(yè)一片混亂。到目前為止,我國水產(chǎn)養(yǎng)殖使用的微生物研究仍然缺乏系統(tǒng)性和深層次性。在菌種選擇、施用條件、施用方法和施用量、菌種間相互作用、配伍的和諧性、作用機理、對環(huán)境的影響形式和影響程度、菌種保存技術(shù)、菌種回收和消除技術(shù)等方面研究還很滯后。
    3.1 加強微生物制劑的基礎(chǔ)理論和作用機制研究
    微生物制劑種類繁多,其作用機制對于不同的環(huán)境和養(yǎng)殖品種是有所不同的,應(yīng)深入加強基礎(chǔ)理論的研究,指導微生物制劑的研制、生產(chǎn)和正確使用。
    3.2 微生物制劑使用方法和劑量的研究
    由于水產(chǎn)養(yǎng)殖品種繁多,其生理狀態(tài)相差較大,養(yǎng)殖環(huán)境差異性明顯,所以應(yīng)根據(jù)不同的養(yǎng)殖種類、不同生理狀態(tài)、不同環(huán)境因素合理用藥。由于微生物制劑的作用效果取決于眾多因素,因此并不是用得越多越好,使用時要選用適宜的菌種,確定較為適宜的比例,根據(jù)實際情況調(diào)節(jié)用量。
    3.3 對微生物制劑的優(yōu)秀廣譜菌株、專一性菌株、復合菌株的選育和應(yīng)用
    目前已經(jīng)使用的益生菌種類相對于自然界中可利用的有益菌種類還很少,具有巨大開發(fā)潛力。例如,如何在分離廣譜性益生菌的同時,向高效專一制劑發(fā)展;研究針對某種動物、某個階段、某些疾病的專用微生物制劑,使其作用更專一、效果更顯著;盡可能根據(jù)菌種的不同特點設(shè)計不同產(chǎn)品;確定動物機體內(nèi)缺少的菌種,添加針對性強的菌種制劑等。
    3.4 向工程菌領(lǐng)域發(fā)展
    將益生菌作為基因工程的受體菌,運用基因工程技術(shù)構(gòu)建更易于生產(chǎn)、保存、定植、繁殖或具有特殊功能的工程菌制劑,從而達到一種制劑發(fā)揮多種功能的目的。
    3.5 微生物新型制劑的研發(fā)
    加強對微生物制劑劑型的研究,提高活菌濃度,提高菌劑中活菌對不良環(huán)境的耐受力,延長產(chǎn)品保存期限。目前普遍使用固定化技術(shù)、真空冷凍干燥技術(shù)和微膠囊技術(shù),制劑采用真空包裝和充氮氣包裝來延長產(chǎn)品保存期。微生物制劑固定化所選用的包埋劑種類和方法還需要進一步研究。
    4· 水產(chǎn)養(yǎng)殖中微生物制劑的前景展望
    目前,我國抗生素濫用現(xiàn)狀難以遏制,使用抗生素類藥物后,會在水產(chǎn)動物體內(nèi)富集殘留,并通過食物鏈直接進入人體,危害人類身體健康。微生物制劑具有無毒、無害、促生長等優(yōu)點,并且可以改善生態(tài)環(huán)境,減少抗生素的使用,避免其在水產(chǎn)品中的積累。用了微生物制劑的水產(chǎn)動物,不僅生長快、發(fā)病少、餌料系數(shù)低,而且品質(zhì)也好。作者在福建長樂南美白對蝦高位池養(yǎng)殖中,使用芽孢桿菌、糞鏈球菌、乳酸菌等微生物制劑,結(jié)果對南美白對蝦水質(zhì)環(huán)境的穩(wěn)定、偷死、防病、保健等都有一定的作用。
    盡管我國對微生物制劑的應(yīng)用和研究比一些發(fā)達國家晚,但僅在短短的幾年里,微生物制劑的研發(fā)和應(yīng)用對促進我國水產(chǎn)業(yè)的發(fā)展已發(fā)揮了積極的作用,且潛力很大。隨著微生態(tài)理論的不斷完善、科技水平的不斷提高、新型生物技術(shù)的迅速發(fā)展,對微生物制劑往“利用基因工程技術(shù)定向改造有益菌株,完善菌種分離技術(shù),加大對菌種配伍技術(shù)的研究力度,應(yīng)用微膠囊技術(shù)進行菌種保存”等幾個方向的研究,微生物制劑勢必將迎來前所未有的發(fā)展機遇,成為抗生素的替代品,對水產(chǎn)業(yè)的健康、生態(tài)養(yǎng)殖帶來更加廣闊的發(fā)展前景。

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